2022-09-01
2022年9月1日，聚焦于基因和細胞治療的上海邦耀生物科技有限公司（以下簡稱“邦耀生物”）宣布，與華東師范大學(xué)、浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院合作的非病毒定點整合CAR-T技術(shù)（Quikin CART?）研究成果于8月31日正式在國際頂級學(xué)術(shù)期刊Nature上發(fā)表。值得一提的是，這是國內(nèi)首次發(fā)表于頂級期刊Nature的CAR-T研究成果。既代表邦耀生物在CAR-T領(lǐng)域取得了巨大的突破，也意味著邦耀生物已成功邁向基因和細胞治療的國際第一梯隊。
Nature發(fā)文
Quikin CART?是邦耀生物搭建的具有自主知識產(chǎn)權(quán)的非病毒定點整合CAR-T平臺，可在不使用病毒載體的情況下，通過一步制備獲得基因組定點整合的CAR-T細胞產(chǎn)品，具有成本低、制備時間短、工藝簡單、安全性和有效性高等優(yōu)點。2020年5月，在浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院開展的全球首個“PD1敲除非病毒定點整合CD19-CART細胞治療復(fù)發(fā)難治性非霍奇金淋巴瘤的臨床試驗”中，該產(chǎn)品體現(xiàn)出了出色的臨床安全性和有效性，首例接受治療的患者至今已疾病完全緩解(CR)超過2年。
Quikin CART?全新升級，更加快速高效
傳統(tǒng)CAR-T產(chǎn)品的制備主要通過病毒載體來實現(xiàn)，這會帶來如下幾個問題：
一、由于病毒采用隨機插入的方式將CAR序列整合到細胞基因組中，可能會改變正?；虻谋磉_，因此存在潛在的致瘤風險，并且通過這種方式制備獲得的CAR-T產(chǎn)品均一性很低； 二、從生產(chǎn)工藝來看，傳統(tǒng)CAR-T產(chǎn)品的制備時間都比較長，目前上市的幾款CAR-T產(chǎn)品制備時間約為15-28天，這極大增加了患者等待用藥的時間，也意味著這樣的CAR-T產(chǎn)品無法用于腫瘤進展非?？斓幕颊?； 三、極大增加了生產(chǎn)成本，從目前在美國上市的幾款CAR-T產(chǎn)品來看，均定價在37.3-47.5萬美元之間，折合人民幣為256.2-326.3萬元。2021年在中國批準的首款CAR-T產(chǎn)品亦是120萬元人民幣的天價，創(chuàng)造了國產(chǎn)藥的定價紀錄。這樣的高價是很多家庭都無力承擔的。
相較而言，Quikin CART?可以有效解決使用病毒載體帶來的幾大難題，展現(xiàn)出了巨大的優(yōu)勢。定點整合可以讓每個CAR序列都精確地插入到基因組的特定位點，能避免隨機插入導(dǎo)致的致瘤風險，最大程度保證了CAR-T產(chǎn)品的安全性和有效性。只需一步制備，即可同時實現(xiàn)CAR的持續(xù)性表達和T細胞內(nèi)源基因的調(diào)控，大大縮短了整個CAR-T產(chǎn)品的制備時間，得以讓更多患者受益。另外，使用非病毒生產(chǎn)工藝還可以極大減少因使用病毒載體帶來的高昂成本。
打破復(fù)發(fā)難治枷鎖，為更多患者點燃希望
非霍奇金淋巴瘤是一種原發(fā)于淋巴組織的血液系統(tǒng)惡性腫瘤，占所有淋巴瘤80%-90%，雖然患者在初次治療后疾病得到緩解，但之后往往出現(xiàn)復(fù)發(fā)。盡管已有CAR-T產(chǎn)品獲批用于復(fù)發(fā)難治性非霍奇金淋巴瘤的臨床治療，可是總體療效依然有限。PD-L1/PD1信號通路是抑制T細胞功能的重要免疫檢查點，有不少研究報道了PD1敲除可有效增強CAR-T細胞的功能。
因此，邦耀生物利用Quikin CART?平臺開發(fā)了靶向CD19非病毒PD1定點整合CAR-T產(chǎn)品（BRL-201）。在臨床前研究中，相比于慢病毒感染和結(jié)合基因編輯技術(shù)敲除PD1的CAR-T細胞，BRL-201無論在PD-L1高表達還是低表達的腫瘤細胞中，都顯現(xiàn)出更強、更持久的殺傷效果，小鼠生存率得到顯著提高。機制研究表明，Quikin CART?技術(shù)本身能顯著提高記憶性T細胞的比例，且PD1表達下調(diào)可以有效增強T細胞的抗腫瘤免疫功能。在開展的BRL-201治療復(fù)發(fā)難治性非霍奇金淋巴瘤臨床試驗中，8例患者接受治療后，未觀察到CAR-T相關(guān)的神經(jīng)毒性和2級以上細胞因子風暴，證明了BRL-201具有出色的臨床安全性。根據(jù)檢測結(jié)果顯示，CAR-T細胞回輸后能在患者體內(nèi)快速擴增并持續(xù)較長時間，接受治療后87.5%的患者獲得了完全緩解（CR）的效果，所有患者均對治療響應(yīng)，客觀緩解率（ORR）為100%。迄今，接受該CAR-T療法的患者無癌生存期最長已超過2年，目前仍處于疾病完全緩解的狀態(tài)。值得一提的是，無論是針對PD-L1高表達腫瘤患者的治療，還是在CAR-T細胞回輸劑量和陽性率較低的條件下，BRL-201均顯示出了良好的療效，證明了其具有強大的腫瘤殺傷能力。
BRL-201在臨床上體現(xiàn)了出色的安全性和有效性
值得一提的是，該成果也獲得了加利福尼亞大學(xué)Justin Eyquem教授和Nature資深編輯Victoria Aranda的高度評價：“全面系統(tǒng)的臨床前研究，成功開發(fā)了非病毒定點整合CAR-T療法，并報道了首個PD1下調(diào)定點整合型CAR-T細胞的臨床試驗結(jié)果。研究人員在臨床治療中觀察到了高比例的腫瘤完全緩解率，且未發(fā)現(xiàn)嚴重的毒副作用，這一令人鼓舞的結(jié)果顯示出這種CAR-T療法具有出色的臨床安全性和有效性。研究人員同時也證明了非病毒定點整合T細胞治療在臨床應(yīng)用的可行性。這一技術(shù)創(chuàng)新為未來更多基因靶向修飾CAR-T療法的發(fā)展奠定了堅實的基礎(chǔ)，對領(lǐng)域發(fā)展具有重要的推動作用。”
首例癌癥患者已超過2年無癌生存
四十歲正值壯年，無奈罹患癌癥
2018年4月，來自廣東的“孫先生”（化名）發(fā)現(xiàn)自己的頸部開始存在腫塊的情況；同年5月，因身體癥狀遲遲未消失，孫先生便前往廣東藥科大學(xué)附屬第一醫(yī)院做檢查，沒想到這次普通的檢查，卻讓剛過40歲的孫先生人生第一次感受到絕望……經(jīng)過影像學(xué)觀察與頸部腫塊活檢，孫先生被確診為“彌漫大B細胞淋巴瘤”。“被醫(yī)生確診我患上了惡性腫瘤的時候，整個人感覺猶如掉進了萬丈深淵一般，這個結(jié)果是我萬萬沒想到的。平時我是一個連感冒都得不了幾回的人，怎么也想不到事先癥狀不明顯，突然一下子就隆起了一個小包塊。”孫先生回憶說。
另外，據(jù)孫先生的妻子透露，當時他們唯一的兒子正值初中，夫妻倆好不容易經(jīng)過十幾年時間將孩子養(yǎng)大，本以為到了四十歲可以輕松點，卻又碰到這樣的事情，聽到醫(yī)生宣布檢查結(jié)果時真的難以置信。是啊，孫先生被確診為淋巴瘤時42歲，這個年紀對于大多數(shù)人來講，正值人生的壯年，看過人生百態(tài)，品過五味陳雜，在積累社會經(jīng)驗之后學(xué)會了方法與智慧，沒了蠻干的迷茫，只剩下厚積薄發(fā)的力量。可命運像跟他開了一個玩笑，罹患癌癥對他及全家而言都是一次致命的打擊。
邦耀生物臨床監(jiān)查員（CRA）向?qū)O先生了解到，面對一年高達幾十萬的治療費其曾想過放棄，但妻子和兒子極力勸他放好心態(tài)，相信如今醫(yī)學(xué)技術(shù)的發(fā)展總會有希望的。于是，在2018年5月至2020年5月的2年時間里，孫先生接受了多次不同方案的化療，然而療效不盡人意，疾病短暫緩解后又復(fù)發(fā)了。
“在接受你們的細胞治療前我已經(jīng)記不清進行了多少次化療，甚至有次進行放療時，還經(jīng)歷了胃部全切除手術(shù)。那個時候，幾乎所有方案都試了一遍，結(jié)果都不盡人意，我覺得相當于給我判了‘死刑’，沒得救了。而且在治病的征途中困難重重，一方面是使我們夫妻倆的工作不斷地遭受中斷；另一方面是經(jīng)濟上的巨大壓力，治療大概已經(jīng)花費了80萬；最后，這樣的家庭現(xiàn)狀對小孩的心理也容易產(chǎn)生影響，他讀高中的時候明顯感覺壓力特別大。對此，真的非常幸運在2020年，我在廣東接受治療的醫(yī)生將我推薦到這個項目中，給了我第二次生命。”孫先生回憶那段痛苦又絕望的治療經(jīng)歷時說。
其實面對CAR-T全新療法的未知，孫先生與妻子在做決定時也曾猶豫過，但在面臨無數(shù)療法都失敗的情況下，孫先生的妻子當機立斷，表示只要有一線生存的希望，就當是最后的救命稻草奮力一搏，選擇治療！
“謝謝新療法，讓我還能看到兒子上大學(xué)”
2020年5月26日，孫先生作為BRL-201臨床試驗的首例患者正式接受細胞輸注；2020年6月9日，孫先生住院治療僅14天后經(jīng)評估出院；在整個CAR-T治療過程中未觀察到藥物相關(guān)的2級以上不良事件，包括CAR-T治療最常見的細胞因子風暴和神經(jīng)毒性?；剌敽?，CAR-T細胞在體內(nèi)能快速擴增，且能維持較長的時間。如今孫先生無癌生存已超過2年，其全家人沒想到接受CAR-T細胞治療可以這么快消除腫瘤，就像是做了一場夢一樣。
在最近的一次隨訪中，孫先生的所有檢查項目均達標，體重甚至比患病前增加了不少，臉色看起來也更紅潤了?！敖?jīng)過細胞治療后身體感覺一下子就恢復(fù)正常了，親朋好友也都說我是奇跡般地康復(fù)了，現(xiàn)在閑暇時還會去打打羽毛球，完全恢復(fù)了患病前的生活狀態(tài)。今年高考，我兒子確定被清華大學(xué)美術(shù)學(xué)院錄取。謝謝細胞療法，讓我還能看到兒子上大學(xué)。再次感謝邦耀生物研發(fā)的細胞治療產(chǎn)品，也感謝浙大一院黃院長的關(guān)心和鼓勵，幫助了我戰(zhàn)勝心魔，篤定前行?！睂O先生感動地向邦耀生物臨床監(jiān)查員（CRA）說。
最近，孫先生與好友相約打羽毛球運動
針對此次合作，該項臨床研究的主要研究者（PI）浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬第一醫(yī)院黃河院長說： “邦耀生物的非病毒定點整合CAR-T產(chǎn)品在臨床治療上體現(xiàn)了出色的安全性和有效性，給淋巴瘤患者帶來了生的希望，我們醫(yī)療組看到患者都能康復(fù)回家，也非常開心。除了孫先生，還有二十多位患者參與到這個項目中來，接受了CAR-T細胞治療后都取得了不錯的療效。目前，邦耀生物的CAR-T細胞療法對特定的淋巴瘤非常有效，期待今后邦耀生物能針對更多的適應(yīng)癥，研發(fā)出更多更好的產(chǎn)品來造福更多的腫瘤患者。”
邦耀生物創(chuàng)始人、董事長劉明耀教授也表示，“2年過去了，患者體內(nèi)沒有癌細胞，并且CAR-T細胞仍然在巡邏和監(jiān)測淋巴瘤，給患者帶來了持久的收益。這些持久的結(jié)果是一項里程碑式的科學(xué)成就。雖然治療復(fù)發(fā)難治性淋巴瘤的CAR-T產(chǎn)品已經(jīng)上市，但CAR-T療法還有待更大的突破。Quikin CART?技術(shù)在不使用病毒的情況下，一步實現(xiàn)CAR元件在基因組的定點整合和T細胞內(nèi)源基因的調(diào)控干預(yù)，極大降低了CAR-T細胞的生產(chǎn)成本，縮短了CAR-T細胞的制備時間，讓CAR-T細胞更安全，更強大有效，得以讓更多患者受益。未來，邦耀生物將始終‘以患者為中心’，積極推動CGT行業(yè)發(fā)展，為更多遺傳疾病與腫瘤疾病患者帶來福音。”
邦耀生物CAR-T技術(shù)創(chuàng)新多元，未來可期
對于中國市場來說，細胞治療從技術(shù)創(chuàng)新到產(chǎn)業(yè)化、商業(yè)化的道路探索才剛剛開始，所以在看到未來發(fā)展前景的同時，需要我們認識到當前CAR-T細胞治療存在的一些困境和挑戰(zhàn)去做前瞻性的技術(shù)布局。
Quikin CART?技術(shù)發(fā)明人，該論文第一作者、共同通訊作者，邦耀生物研發(fā)副總裁、華東師范大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院副研究員張楫欽博士說：“近年來，CRISPR/Cas9基因編輯技術(shù)的不斷成熟和發(fā)展讓我們萌生了將其應(yīng)用于CAR-T治療的想法。通過對現(xiàn)有CAR-T技術(shù)的深入剖析以及對目前CAR-T治療領(lǐng)域存在問題的系統(tǒng)梳理，我們意識到利用基因編輯技術(shù)來制備非病毒定點整合CAR-T細胞是一個具有巨大潛力的發(fā)展方向。我們通過大量的方法摸索和條件優(yōu)化，建立了成熟的Quikin CART?技術(shù)平臺。Quikin CART?技術(shù)可以在不使用病毒載體的情況下，通過一步制備同時實現(xiàn)CAR穩(wěn)定表達和內(nèi)源基因調(diào)控，能使CAR-T細胞的改造更加精準化，也因此具備了現(xiàn)有其他CAR-T技術(shù)所沒有的諸多優(yōu)點。我們有望利用這一全新一代的CAR-T技術(shù)，開發(fā)出更多成功有效的CAR-T產(chǎn)品，來造福更多的患者。同時，隨著近年來基因編輯等新興生物技術(shù)的發(fā)展，相信今后會有更多先進、強大的技術(shù)平臺被陸續(xù)開發(fā)出來，我們在技術(shù)迭代上也會努力做出更多突破性的工作，以期為疾病的臨床治療帶來更多的希望。”
目前，邦耀生物針對CAR-T療法的技術(shù)瓶頸，除了“非病毒定點整合CAR-T平臺（Quikin CART?）”外，還打造了“通用型細胞平臺（TyUCell?）”和“增強型T細胞平臺（HyperTCell?）”等技術(shù)平臺。其中，TyUCell?主要是利用基因編輯技術(shù)改造異體免疫細胞以消除免疫排斥，在保障細胞產(chǎn)品安全性和有效性的基礎(chǔ)上，實現(xiàn)了免疫細胞治療產(chǎn)品的通用化；而HyperTCell?平臺主要通過T細胞的基因改造來攻克實體瘤治療的世界難題。
邦耀生物作為一家聚焦于基因治療和細胞治療藥物研發(fā)和轉(zhuǎn)化的企業(yè)，一直在堅持技術(shù)創(chuàng)新，不僅不斷在克服行業(yè)壁壘進行多管線戰(zhàn)略布局，同時致力于開發(fā)國際領(lǐng)先的基因編輯工具，獲得具有自主知識產(chǎn)權(quán)的核心技術(shù)。目前研究成果已在國際著名學(xué)術(shù)期刊Nature、Nature Medicine、Nature Biotechnology、Nature Cell Biology、Cell Research 等發(fā)表多篇學(xué)術(shù)論文，同時邦耀生物已申請并獲得多項發(fā)明專利，且進行了全球化布局。未來旨在力求解決基因和細胞治療中遇到的核心問題和卡脖子的技術(shù)難題，從而為更多遺傳疾病與腫瘤疾病患者帶來福音，造福人類！
